近日,德国Toptica公司和英国is-instruments公司共同开发出了一款深紫外(UV)拉曼平台。该平台的构想是应用于生产生物治疗产品,包括单克隆抗体和抗体片段。
近年来,利用深紫外波长的拉曼技术成为了一种很有吸引力的技术,可以在较低的样品浓度下提供高荧光水平。但这些仪器往往价格昂贵,操作复杂。
与之前的设备不同的地方在于,奥丁光谱仪(Odin spectrometer)使用了一种特殊的固态激光和空间外差光谱仪,尽可能地简化了设备的设计,新的架构据说是为了紧凑的占地面积和易于集成而设计的。
“深紫外共振拉曼很早就被认为具有测量其他光谱技术迄今无法测量的物质的潜力。同样,目前可用的仪器都非常大,购买和维护都很昂贵。”IS-Instruments公司的Michael Foster评论道。
“这使得技术只对那些有物理空间来容纳它们,并有大量预算来运营它们的组织开放。Odin与之不同,因为它更小,没有与高运营成本相关的内部机制。”
深紫外共振拉曼光谱(UVRRS)的基本原理是,如果激发激光的能量与感兴趣的分子中的电子跃迁相对应,固有的微弱拉曼信号可以得到增强。在适当的条件下,这种共振现象可以大大增强拉曼信号。
“在250纳米操作下,目标拉曼和荧光响应在光谱上得到分离,允许对样品进行详细分析。当激光波长降低到250 nm以下时,它接近几个有机分子的电子跃迁,产生一种共振效应,可以将拉曼信号放大几个数量级。”开发人员在论文中评论道。
所需的深紫外光源对UVRRS在成本敏感的情况下的采用提出了一个特殊的障碍。Odin采用Toptica固态二极管源TopWave 229,具有设计定制的性能特点,因此更适合此类应用。
Toptica公司表示:“这种紧凑的深紫外拉曼仪器使用了二极管泵浦激光器和空间外差光谱仪(SHS),并结合了全反射拉曼收集探针。”“二极管激光器使仪器保持紧凑的形式,而SHS允许大的光吞吐量,从而在目标处产生相对较大的激光光斑,减轻功率密度导致的样品损伤。”
在试验中,Odin仪器成功地捕获了一系列生化样品的拉曼光谱,包括不同浓度的免疫球蛋白(IgG)、色氨酸和一系列结构域抗体(dAb)样品。dAb样品在生物反应器中试生产过程的不同阶段和不同稀释度下提取。
据开发人员称,这是“首次对这种类型的研究进行观察”。这证明了该技术在监测生物技术生产过程、同时确定样品浓度方面的潜力,并突出了该仪器在提高产量和减少浪费方面的潜力。”